Fixierungswege

Fixierungswege bezeichnet in der Biologie und Histologie die Verfahren, mit denen Gewebe, Zellen oder Organismen so behandelt werden, dass ihre Struktur dauerhaft erhalten bleibt und weiter analysiert werden kann. Ziel ist die Unterbindung autolytischer Prozesse und die Stabilisierung von Makro- und Mikrostrukturen.

Chemische Fixation nutzt Fixativa, die Proteine und Lipide vernetzen oder koagulieren. Häufig eingesetzt sind aldehydische Fixative wie Formaldehyd (z. B. Paraformaldehyd) und Glutaraldehyd; Alkoholfixative wie Methanol wirken durch Denaturierung. Formaldehyd eignet sich gut für Lichtmikroskopie und Immunhistochemie, Glutaraldehyd wird bevorzugt für die Elektronenmikroskopie eingesetzt; Osmiumtetroxid fixiert Lipide. Nachfixierung, Waschen und ggf. Einbettung folgen. Die Wahl hängt vom weiteren Verfahren ab (Mikroskopie, Antigen­erhaltung, Membranstabilität).

Physikalische Fixierung umfasst Kryo-Fixierung durch schnelles Einfrieren und Hochdruck-Fixierung, oft begleitet von Gefriersubstitution. Vorteile sind bessere Erhaltung von Lipiden und antigenen Strukturen sowie geringere Artefaktbildung im EM-Bereich.

Wichtige Einflussfaktoren sind Fixativkonzentration, pH-Wert, Temperatur, Gewebedicke, Eindringtiefe und Einwirkzeit. Fehlkalibrierte Parameter verursachen Artefakte wie Gewebeschrumpfung, Struktursveränderungen oder Epitope-Verlust. Nach der Fixierung erfolgen Waschen, ggf. Nachfixierung, Dehydratisierung, Einbettung und Lagerung.

Sicherheit: Viele Fixative, insbesondere Formaldehyd, gelten als krebserzeugend; Arbeiten erfolgen unter geeigneten Schutzmaßnahmen und Belüftung. Anwendungen reichen von Histologie und Pathologie über Immunhistochemie bis zur Elektronenmikroskopie.