DNAExtraktion

DNAExtraktion bezeichnet die Gewinnung von Desoxyribonukleinsäure (DNA) aus biologischem Material wie Zellen, Gewebe oder Bakterien. Ziel ist es, DNA in einer intakten Form zu isolieren, sodass sie für molekulare Analysen wie PCR, Sequenzierung oder Klonierung verwendet werden kann.

Der Prozess umfasst typischerweise: Zellaufschluss, wobei Zellmembranen und Nukleinsäuren freigesetzt werden; Entfernung von Proteinen, Lipiden und anderen Verunreinigungen; Reinigung und Konservierung der DNA; und gegebenenfalls Konzentration. Die Methoden variieren je nach Probenmaterial, gewünschter Reinheit und Verwendungszweck.

Häufige Extraktionsmethoden: organische Extraktion mit Phenol-Chloroform; Salting-out-Verfahren; Silikagel-Säulen oder magnetische Beads in kommerziellen Kits. Organische Verfahren liefern oft hohe Reinheit, Kits sind schneller und standardisierbar. Bei empfindlicher DNA werden schonendere oder enzymatische Inaktivierung genutzt.

Anwendungen: genetische Analysen, PCR, Genom- oder Transkriptomsequenzierung, forensische Analysen, Diagnostik, Bakterien- oder Artenbestimmung. Qualitätsbewertung: Reinheit wird häufig durch Spektralphotometrie überprüft (z. B. A260/280 ideal ca. 1,8–2,0; A260/230 > 2,0). Die Integrität der DNA lässt sich durch Gel-Elektrophorese oder Fragmentanalyse beurteilen.

Herausforderungen: Verunreinigungen oder DNasen können Analysen stören; Proben müssen kühl gelagert und kontaminationsfrei bearbeitet werden. Rechtliche und ethische Aspekte gelten bei menschlichen Proben, z. B. Einwilligung und Datenschutz.