Phasenkontrastmikroskop

Phasenkontrastmikroskop (Phasenkontrastmikroskopie) ist eine Form des Lichtmikroskops, die Kontrast in transparenten Proben sichtbar macht, ohne dass Proben eingefärbt werden müssen. Sie nutzt Phasenverschiebungen des durch die Probe gehenden Lichts, die durch Unterschiede in Dichte, Struktur und Gewebekomponenten entstehen, und wandelt sie in Helligkeitsunterschiede um.

Prinzipiell arbeitet ein Phasenkontrastmikroskop mit einer kondensorseitig eingefügten ringförmigen Blende (Annulus) und einer Phasenplatte im Objektiv oder in der Nähe der Backfokalebene. Das ungestreute Lichtteil (das die Probe unverändert passiert) erhält durch die Phasenplatte eine definierte Phasenverschiebung, typischerweise ca. 90 Grad. Das diffraktierte Lichtteil, das durch Strukturen gestört wird, interferiert mit diesem ungestreuten Licht, wodurch Unterschiede in der Intensität entstehen und feine Details sichtbar gemacht werden. Eine sorgfältige Köhler-Beleuchtung und Einstellmöglichkeiten sind wichtig, um artefaktarme Bilder zu erhalten.

Aufbau und Bedienung: Wesentliche Komponenten sind Kondensor mit annularer Blende, Objektiv mit integrierter Phasenplatte bzw. Phasenringen, Zentrier- und Justage-Einrichtungen sowie geeignete Beleuchtung.

Anwendungen und Vorteile: Phasenkontrast ermöglicht die Beobachtung lebender, ungefärbter Zellen, Mikroorganismen und Gewebestrukturen mit guter Detailauflösung, ohne Proben zu färben. Das Verfahren ist schnell einsatzbereit und eignet sich gut für Bildungs- und Forschungszwecke, klinische Mikro- und Zelluntersuchungen.

Begrenzungen: Halo- und Randartefakte, begrenzte Tiefenwirkung bei dicken Proben sowie Empfindlichkeit gegenüber exakter Ausrichtung und Beleuchtung. Historisch stammt das Verfahren von Frits Zernike (Nobelpreis 1953).