immunfluoreszcens

Immunfluoreszenz ist eine immunhistochemische Färbetechnik, die fluoreszierende Farbstoffe verwendet, um spezifische Antigene in Gewebeproben oder Zellen zu lokalisieren. Diese Methode beruht auf der hochspezifischen Bindung von Antikörpern an ihre Zielantigene. Dabei wird ein Antikörper, der an ein fluoreszierendes Molekül gekoppelt ist, auf die Probe aufgetragen. Wenn der Antikörper an das gewünschte Antigen bindet, beginnt das Fluoreszenzmolekül zu leuchten, wenn es mit Licht einer bestimmten Wellenlänge angeregt wird.

Die Immunfluoreszenz kann als direkt oder indirekt durchgeführt werden. Bei der direkten Immunfluoreszenz wird ein primärer Antikörper verwendet, der bereits mit einem Fluorochrom konjugiert ist. Dieser primäre Antikörper bindet direkt an das Zielantigen. Bei der indirekten Immunfluoreszenz wird zunächst ein primärer Antikörper an das Antigen gebunden, und anschließend wird ein sekundärer Antikörper, der mit einem Fluorochrom konjugiert ist, verwendet, um an den primären Antikörper zu binden. Die indirekte Methode bietet oft eine höhere Empfindlichkeit und Flexibilität.

Die Fluoreszenz wird unter einem Fluoreszenzmikroskop beobachtet, das die Probe mit spezifischen Wellenlängen beleuchtet und das emittierte Licht mit einem Filter einfängt. Dies ermöglicht die Visualisierung der räumlichen Verteilung des Antigens innerhalb der Zelle oder des Gewebes. Immunfluoreszenz ist ein wertvolles Werkzeug in der Forschung und Diagnostik, beispielsweise zur Identifizierung von Krankheitserregern, zur Charakterisierung von Zelltypen oder zur Untersuchung von Proteinlokalisation und -funktion. Sie wird in der Virologie, Bakteriologie, Pathologie und Zellbiologie weit verbreitet eingesetzt.