Deparafinisering

Deparafinisering is het proces waarbij paraffinewas uit weefsels die in paraffine zijn ingebed wordt verwijderd, zodat het materiaal weer geschikt is voor verdere histologische kleuringen en analyses. Het is een standaard stap in de preparatie van histologische secties en immunohistochemie. Doel is om paraffine te verwijderen zodat waterige reagentia vrij kunnen doordringen en kleuringen volgens protocol kunnen verlopen.

Tijdens deparafinisering worden secties doorgaans behandeld met organische oplosmiddelen die paraffine oplossen. De meest gangbare methode is het gebruik van xyleen in één of meerdere stappen, gevolgd door rehydratie door een reeks oplosmiddelconcentraties van hoog naar laag (bijv. ethanol) totdat het weefsel volledig wateropneembaar is en klaar voor kleuring. Xyleenvrije protocollen maken gebruik van substituten zoals terpene- of limoneenachtige oplosmiddelen en kunnen de gezondheid en het milieu beter treffen.

Varianten en overwegingen: in sommige laboratoria worden kortere of agressievere deparafiniseringen toegepast om arbeidsstromen te versnellen, maar dit kan de integriteit van weefsel en antigenen beïnvloeden. Onvoldoende verwijdering van paraffine leidt tot stoornissen bij kleuring en impedieert reagentiepenetratie; overmatig contact kan de weefselstructuur beschadigen. Microwave-ondersteunde of volledig xyleenvrije methoden bestaan ook en worden gebruikt om kosten en milieu-impact te verlagen.

Veiligheid en milieu: xyleen is giftig en irriteert de huid en ogen; toegangscontrole en afzuiging zijn vereist. Steeds vaker worden milieuvriendelijkere oplosmiddelen en afvalbeheersingsmaatregelen toegepast. Deparafinisering blijft een cruciale stap voor betrouwbare histologie en diagnostiek.