anregungswellenlänge

Die Anregungswellenlänge bezeichnet in der Fluoreszenz- und Spektroskopie die Wellenlänge des Lichts, das verwendet wird, um eine Probe aus dem Grundzustand in einen angeregten elektronischen Zustand zu versetzen. Sie wird in der Praxis aus dem Absorptionsspektrum der Probe und der Leistungsfähigkeit der Lichtquelle gewählt.

Der Zusammenhang ergibt sich aus der Photonenergie E = hc/λ: Je kürzer die Wellenlänge, desto größer die Anregungsenergie. In der Regel liegt die Anregungswellenlänge nahe dem Maximum des molaren Absorptionskoeffizienten, um eine möglichst effiziente Anregung zu erreichen. Gleichzeitig müssen Überanregung, Photobleaching und Hintergrundsignale vermieden werden.

In der Fluoreszenzspektroskopie dient die Anregungswellenlänge dazu, das gewünschte Fluorophor-Programm selektiv zu stimulieren. Die Emission erfolgt typischerweise bei längeren Wellenlängen als die Anregung, was als Stokes-Verschiebung bezeichnet wird.

Bei mehrkanaliger Messung, wie der Excitation-Emission Matrix, werden verschiedene λ_ex-Werte verwendet, um die Signale unterschiedlicher Fluorophore abzuleiten und zu charakterisieren. Die Wahl von λ_ex hängt von der Probe, dem angestrebten Signal-Raum-Verhältnis, der Verfügbarkeit von Lichtquellen und optischen Filtern ab. In der Praxis werden oft mehrere Anregungswellenlängen eingesetzt, insbesondere in der Mehrfarbendiagnostik oder der Mikroskopie, um verschiedene Farbstoffe zu unterscheiden, ohne Überlappungen zu erzeugen.