RNaseVerunreinigungen

RNaseVerunreinigungen bezeichnet die unbeabsichtigte Kontamination von Proben, Reagenzien oder Arbeitsumgebungen mit Ribonukleasen (RNasen). RNasen sind Enzyme, die RNA schnell und spezifisch abbauen. Aufgrund ihrer Verbreitung und Stabilität gelten sie als zentrale Kontaminationsquelle in der Molekularbiologie.

RNasen sind in vielen Lebensbereichen verbreitet und können von Haut, Haaren, Fingernägeln, Staub, Wasser und Laborgeräten stammen. Viele RNasen bleiben auch nach üblichen Reinigungen aktiv und können bereits kleinste Spuren einer RNA abbauen. Deshalb erfordern RNasen-freie Verfahren strikte Hygienemaßnahmen, besonders bei Probenmaterial wie mRNA oder mRNA-Expressionsstudien.

Die Auswirkungen von RNase-Verunreinigungen können gravierend sein: RNA-Proben können degradiert werden, was RT-PCR, Reverse-Transkriptase-, Northern-Blot-Analysen oder RNA-Sequenzierungen unbrauchbar macht oder zu fehlerhaften Ergebnissen führt. Schon geringe RNasen-Konzentrationen reichen aus, um signifikante Qualitätsverluste zu verursachen.

Zur Erkennung von RNase-Verunreinigungen dienen Tests auf RNase-Aktivität und Qualitätskontrollen der RNA, wie die Überprüfung der Integrität durch Gel-Elektrophorese oder Bioanalyzer-Analysen. In vielen Laboren werden zusätzliche Kontrollen genutzt, um Kontaminationen frühzeitig zu erkennen und auszuschließen.

Prävention und Kontrolle beruhen auf einem RNase-freien Workflow: Verwendung von zertifizierten RNase-freien Verbrauchsmaterialien (Tubes, Pipettenspitzen), separaten Arbeitsbereichen, Handschuhen, sauberen Oberflächen und RNase-Deaktivierungs- oder -Entfernungsmitteln. Wasser und Reagenzien sollten als RNase-frei gelten, idealerweise durch spezielles Wasser oder Behandlung entsprechend vorbereitet. Regelmäßige Schulung und strengere Verfahrensanweisungen helfen, RNase-Verunreinigungen zu minimieren.