sekundärantikropp

Sekundärantikropp, eller sekundärant­ikropp, är en antikropp som används i immunologiska tester för att detektera en primärantikropp. Den binds till Fc-regionen hos primärantikroppen och är ofta riktad mot antigens specifika värdart som används för att producera primärantikroppen. Sekundärantikroppar tillverkas vanligen i ett annat djur än där primärantikroppen togs fram och kan vara riktade mot hela IgG-klassens enhet eller mot specifika underklasser.

Sekundärantikroppar produceras vanligtvis i kreatur som get, åsna eller kanin och kan vara odifferentierade eller subclass-specifika. De är ofta konjugerade till olika detektionssystem, såsom enzymet horseradish peroxidase (HRP) eller alkaline phosphatase (AP), fluorescerande färgämnen (t.ex. FITC, Alexa-dyes), biotin eller kolloidalt guld, vilket möjliggör visuella eller kvantitativa signaler i olika tekniker.

Vanliga användningsområden inkluderar ELISA, Western blot, immunohistokemi/immunofluorescens och immunocytokemi. Sekundärantikroppen ökar signalen och förenklar detektion av primärantikroppen, samtidigt som den gör det möjligt att byta detektionssystem utan att behöva tillverka nya primärantikroppar för varje märkning.

Viktiga överväganden är val av rätt sekundärantikropp till primärens art och IgG-undre klass, potential för korsreaktivitet, och behov av Fc-blockering eller Fc-restriktioner för att minska bakgrund. Vid noggrann val och lämpliga kontroller ger sekundärantikroppar snabb och flexibel signalavläsning i många immunologiska analyser.