autoradiografie

Autoradiografie ist eine bildgebende Methode zur Visualisierung der räumlichen Verteilung radioaktiv markierter Moleküle in einem Probenmaterial, indem die emittierte Strahlung auf einen fotografischen Detektor übertragen wird. Typische Tracer umfassen Beta-Emitters wie Tritium (3H), Kohlenstoff-14 (14C), Phosphor-32 (32P) und Schwefel-35 (35S) sowie Gamma-Emitter wie Iod-125 (125I) in bestimmten Anwendungen. Die Proben können Gewebeabschnitte, Zellen, Blots oder Gele sein, die radiomarkierte Substanz enthalten.

Prinzip und Detektion: Der Zerfall der radioaktiven Kerne erzeugt Strahlung, die auf den Detektor trifft. Dadurch entsteht ein latent image auf Film oder auf Phosphorschirmen, das nach Entwickeln bzw. Scannen sichtbar wird. Die Intensität des Bildes steht in relation zur lokalen Radioaktivität und lässt sich durch Kalibrierung auch quantitativ auswerten.

Durchführung: Typische Verfahren umfassen Film-Autoradiografie, bei dem Proben direkt auf Fotofilm platziert werden, sowie Phosphorbild- oder Phosphor-Imaging-Ansätze, bei denen eine Speicherplatte verwendet und digital ausgelesen wird. Anwendungen umfassen In-situ-Hybridisierung mit radiomarkierten Sonden, Nachweis radiolabelter Nukleinsäuren oder Proteine auf Blots (z. B. Northern-, Southern- oder Western-Blots) sowie Lager- oder Stoffwechselwechsel-Studien.

Vor- und Einschränkungen: Autoradiografie bietet hohe Spezifität und Sensitivität, erfordert jedoch längere Belichtungszeiten, sichere Handhabung radioaktiver Stoffe und geeignete Abschirmung. Die Auflösung hängt vom Emissionsspektrum und dem Detektor ab; Isotopenwahl bestimmt Expositionsdauer und Detektionshäufigkeit.