RNasefrihed

RNasefrihed beskriver tilstanden hvor miljø, redskaber og reagenser i en laboratorieproces er fri for RNaser, de enzymer der nedbryder RNA. For arbejde med RNA er RNasefrihed afgørende for at bevare RNAets integritet under udvinding, håndtering og analyse.

RNaser findes udbredt i naturlige og menneskeskabte miljøer, og de er yderst robuste. Kontaminering af RNA kan føre til nedbrydning, nedsat udbytte og skæve eller ugyldige resultater i teknikker som RT-qPCR, RNA-sekventering og Northern blot.

Praktiske foranstaltninger omfatter anvendelse af RNasefri forbrugsvarer og reagenser (rør, tips, beholdere) med certifikat, dedikeret arbejdsområde til RNA-håndtering og grundig rengøring af overflader med RNaseafvisende midler (f.eks. RNase-away eller RNase Zap) og 70% ethanol. Brug af barrier tips, engangshandsker og separate sæt til RNA-arbejde hjælper med at reducere kontaminering. Materialer opbevares i lukkede beholdere og opbevares adskilt fra ikke-RNase-arbejde.

Vand og reagenser bør være certificeret RNasefri. Mange laboratorier anvender DEPC-behandlet vand eller kommercielt RNasefrit vand; DEPC-vand kræver ofte inaktivering og autoklavering før brug. Som alternativ bruges ofte sterile, færdigcertificerede RNasefri produkter. RNA-handlinger bør ske på is, og der bør undgås længere tids eksponering og unødig håndkontakt.

RNasefrihed er en praksis med kontinuerlig vedligeholdelse og bevidsthed; absolut RNasefrit miljø kan være umuligt, men det tilstræbes at minimere kontaminering gennem hele arbejdsgangen. Certificeringer og regelmæssige kontroller hjælper med at opretholde tilstanden.