Mobilfasen

Mobilfasen är den fas i kromatografi som rör sig genom kolonnen och transporterar analyterna förbi den stationära fasen. Den kan vara en vätska i vätskekromatografi (LC/HPLC) eller en inert gas i gaskromatografi (GC). I LC består mobilfasen vanligtvis av en blandning av vattenbaserade lösningar och organiska lösningar som acetonitril eller metanol, ibland buffertar för att kontrollera pH och jonstyrka. I GC fungerar mobilfasen som carrier gas, där helium ofta föredras, men även vätgas eller kväve används beroende på kolonn och detektor.

Mobilfasens sammansättning och polaritet påverkar hur ämnen fördelar sig mellan den stationära och rörliga fasen, vilket styr retentionstider och separationens upplösning. I LC kan man använda isokratiska elutioner med konstant sammansättning eller gradient-elution där sammansättningen ändras under separationen för att optimera olika analyter. I GC måste mobilfasen vara mycket ren och inert, och flöde/tryck anpassas till kolonnens längd och diameter samt till detektorn.

Praktiska krav innefattar degassing och filtrering av mobilfasen, förvaring i lämpliga behållare och att den är kemiskt kompatibel med kolonnen och detektorn. Valet av mobilfas beror på analyternas egenskaper, kolonnens material och den önskade känsligheten.

Sammanfattning: Mobilfasen är den flytande eller gasformiga fas som möjliggör separationen genom att bära analyter genom kolonnen och påverka deras fördelning mellan faserna. Den spelar en central roll för hastighet, upplösning och metodens känslighet.