Entparaffinierung

Entparaffinierung bezeichnet in der Histologie den Prozess der Entfernung von Paraffinwachs aus mikrotomisch geschnittenen Gewebeschnitten, die in Paraffin eingebettet sind. Ziel ist es, das Gewebe für nachfolgende Färbe- und Immunhistochemie-Schritte zugänglich zu machen, da Paraffin die Penetration von Farbstoffen und Antikörpern behindern würde.

Typischer Ablauf: Die Schnitte liegen auf Objektträgern und werden zunächst durch Entparaffinierung mit Lösungsmitteln behandelt. Historisch verwendet man dafür Xylol (Xylol bzw. Xylene) oder xylolbasierte Ersatzmittel. Zwei bis drei Wechsel à 5–10 Minuten sind üblich, bis das Paraffin weitgehend entfernt ist. Danach erfolgt eine Rehydrierung durch abgestufte Ethanolreihen (z. B. 100%, 95%, 70%) bis Wasser erreicht ist, damit das Gewebe für die Färbung bereitsteht.

Alternativen und Sicherheit: In vielen Labors werden xylolfreie Entparaffierungsmittel eingesetzt, z. B. terpenebasierte oder pflanzenölbasierte Lösungen, um Gesundheitsrisiken durch Xylol zu reduzieren. Moderne automatisierte Stainer integrieren Entparaffinierung oft in voreingestellten Protokollen. Wegen der Toxizität und Reizwirkung von Xylol gelten entsprechende Sicherheitsvorkehrungen (Arbeiten in Abzug, geeignete Schutzausrüstung, gute Belüftung).

Qualitätseinfluss: Unvollständige Entparaffinierung kann zu ungleichmäßigem Farbstoffauftrag, schlechter Farbintensität oder Artefakten führen. Daher ist eine sorgfältige Entfernung des Paraffins in ausreichender Zeitspanne und mit geeigneten Lösungsmitteln essenziell, gefolgt von einer gründlichen Rehydrierung.