espectrofotómetro

Un espectrofotómetro es un instrumento analítico que mide la intensidad de la luz, o su transmisión, a través de una muestra en función de la longitud de onda. Su uso central es cuantificar la concentración de sustancias químicas en solución, basándose en la relación entre absorción de la luz y concentración descrita por la ley de Beer-Lambert. Un espectrofotómetro típico consta de una fuente de luz, un monocromador (prisma o rejilla) para seleccionar una longitud de onda, una celda o porta-muestras que contiene la muestra, y un detector que convierte la luz transmitida o la absorbida en una señal eléctrica; el sistema puede ser de haz único o de haz doble, y el detector suele ser fotodiodo o fotomultiplicador.

La mayor parte de los espectrofotómetros operan en la región ultravioleta-visible (aprox. 190–1100 nm), aunque existen modelos para infrarrojo cercano y otras regiones. En la práctica se mide la transmitancia (T = I/I0) o la absorbancia (A = log10(I0/I)), y, mediante la ley de Beer-Lambert, A = εlc, donde ε es la absorbancia molar, l la longitud del camino óptico y c la concentración.

Las aplicaciones abarcan química analítica, bioquímica, farmacéutica, clínico y ambiental, para determinación de concentraciones, cinética de reacciones, control de calidad y caracterización de compuestos. La precisión depende de una correcta calibración con blancos y patrones, de la limpieza de las cubetas, del control de la longitud de camino y de la coincidencia de longitud de onda. Limitaciones incluyen turbidez, fluorescencia y desviaciones de linealidad a altas concentraciones.