Peroxidasreagenser

Peroxidasreagenser är kemiska produkter som används för att visa peroxidasaktivitet i immunologiska och histologiska metoder. Den vanligaste enzymkomponenten är horseradish peroxidase (HRP), ofta kopplat till antikroppar eller andra bindningsreaktiva enheter i konjugerade reagens. Peroxidasreagenser används i en mängd olika analyser där en oxiderande process av väteperoxid genererar en synlig signal som kan mätas eller observeras visuellt.

Reagenterna kan delas in i substrat som bildar en kromogen, fluorescerande eller luminescerande signal när HRP överför oxidanter från väteperoxid till substratet. Vanliga kromogena substrat är TMB (blå färg som blir gul vid stopp), ABTS och diaminobenzidin (DAB), där DAB ger en brunt beläggning. Fluorogena substrat ger en förstärkt signal under fluorescens avläsning, medan luminol- eller andra chemiluminescerande substrat avger ljus vid oxidation. Reagenssystemen kräver ofta en buffertlösning med rätt pH och tillsats av väteperoxid som donator av oxidationskraft.

Användningsområden inkluderar diagnostiska tester och forskningsmetoder som ELISA, Western blot och immunohistokemi, där HRP-konjugerade antikroppar eller proteiner används för att skapa och förstärka signalen. Viktiga överväganden är att minska bakgrunds.signal, undvika inaktivering av enzymet och följa tillverkarens instruktioner för blandning och lagring. Förvaringskrav varierar, men många produkter ska skyddas mot ljus, förvaras kallt och komma till användning före utgångsdatum. Säkerhet är viktigt eftersom vissa substrat och väteperoxid kan vara farliga; användning kräver lämpliga skyddsåtgärder och avfallshantering.