pylväskromatografian

Pylväskromatografia on nestekromatografian tekniikka, jota käytetään yhdisteiden erottamiseen seoksesta. Se perustuu yhdisteiden erilaisiin vuorovaikutuksiin liikkuvan faasin (yleensä liuottimen) ja kiinteän faasin (adsorbentin) välillä. Yhdisteet, jotka vuorovaikuttavat vahvemmin kiinteän faasin kanssa, liikkuvat hitaammin pylvästä alas, kun taas heikommin vuorovaikuttavat yhdisteet liikkuvat nopeammin. Tämän eron ansiosta seoksen komponentit voidaan erottaa toisistaan.

Tyypillisesti pylväskromatografiassa käytetään lasista tai muovista valmistettua pylvästä, joka täytetään adsorbentilla, kuten piidioksidilla tai alumiinioksidilla. Sen jälkeen seos annostellaan pylvään yläosaan. Liikkuva faasi, eli eluentti, pumpataan sitten pylvään läpi. Eluentti kuljettaa seoksen komponentit pylvään läpi, ja ne kerätään pylvään alapäästä erillisinä fraktioina. Fraktiot analysoidaan usein esimerkiksi spektrofotometrialla tai massaspektrometrialla tunnistamisen ja kvantifioinnin varmistamiseksi.

Pylväskromatografiaa käytetään laajasti kemiassa, biokemiassa ja farmasiassa erilaisten aineiden, kuten proteiinien, lääkeaineiden ja luonnontuotteiden erottamiseen ja puhdistamiseen. Sitä voidaan käyttää sekä analyyttisiin että preparatiivisiin tarkoituksiin, eli pienien määrien analysointiin tai suurempien määrien puhdistamiseen. Tekniikan tehokkuus riippuu adsorbentin valinnasta, eluentin koostumuksesta ja pylvään mitoituksesta.