pylväskromatografiassa

Pylväskromatografia on nestekromatografian tekniikka, jota käytetään seosten erottamiseen. Siinä hyödynnetään stationaarista faasia, joka on pakattu lasi- tai muovipylvääseen, ja liikkuvaa faasia, joka on liuotin. Seos syötetään pylvään yläpäähän, ja liikkuva faasi virtaa sen läpi. Eri komponentit seoksesta vuorovaikuttavat stationaarisen faasin kanssa eri tavoin niiden kemiallisten ominaisuuksien perusteella. Komponentit, jotka vuorovaikuttavat vahvemmin stationaarisen faasin kanssa, liikkuvat hitaammin pylvään läpi, kun taas ne, jotka vuorovaikuttavat heikommin, liikkuvat nopeammin. Tämä ero nopeudessa johtaa komponenttien erottumiseen pylväässä.

Kun liikkuva faasi on kulkenut koko pylvään läpi, erotetut komponentit kerätään erillisiin astioihin. Tätä keräysprosessia kutsutaan fraktioiden keräämiseksi. Fraktioita analysoidaan tyypillisesti tunnistamista ja kvantifiointia varten. Pylväskromatografia voi olla preparatiivista tai analyyttistä. Preparatiivinen pylväskromatografia keskittyy suurempien ainemäärien erottamiseen puhdistustarkoituksessa, kun taas analyyttinen pylväskromatografia on suunniteltu seoksen komponenttien tunnistamiseen ja määrän mittaamiseen. Tekniikka on monipuolinen ja soveltuu laajasti erilaisten yhdisteiden, kuten proteiinien, nukleiinihappojen ja pienempien orgaanisten molekyylien erottamiseen.