CFUZählung

Die CFU-Zählung (Colony Forming Units) ist eine microbiologische Methode zur Abschätzung der Anzahl lebensfähiger Mikroorganismen in einer Probe. Sie basiert auf dem Prinzip, dass jeder lebensfähige Keim eine Kolonie auf einem geeigneten Wachstumsmedium bildet. Das Ergebnis wird üblicherweise als CFU pro Milliliter (CFU/mL) oder CFU pro Gramm angegeben.

Ablauf und Einsatzgebiete: Typischerweise werden Serienverdünnungen der Probe hergestellt, die Verdünnungen plattiert oder filtriert und anschließend inkubiert. Typische Plattverfahren sind Spread-Plating oder Pour-Plating. Die Kolonien werden in einem festgelegten Bereich gezählt, üblicherweise 30–300 Kolonien pro Platte, um statistische Zuverlässigkeit sicherzustellen. Bei niedrigen Konzentrationen kann Filtration eingesetzt werden, gefolgt von Ausplattieren des Retentats. Je nach Organismus und Medium erfolgen die Inkubation unter spezifischen Bedingungen von Temperatur, Feuchtigkeit und Nährstoffzusatz.

Berechnung und Kriterien: CFU/mL = Anzahl der Kolonien geteilt durch (volumen_plattiert in mL multipliziert mit dem Verdünnungsfaktor). Der Verdünnungsfaktor entspricht dem Kehrwert der Verdünnungsstufe (z. B. 10^−3 ergibt Faktor 1000). Eine korrekte Bestimmung erfordert geeignete Kontrollen, Replikate und die Einhaltung der Zählregeln.

Wichtige Einschränkungen: Die CFU-Zählung erfasst nur lebensfähige, kultivierbare Zellen unter den gewählten Bedingungen; Zellen im VBNC-Zustand oder solche, die unter den Bedingungen nicht wachsen, werden nicht erfasst. Zellclumping, Medium- oder Inkubationswahl sowie räumliche Verteilung können das Ergebnis beeinflussen.

Anwendungen und Medien: Häufige Anwendungen finden sich in der Lebensmittel- und Getränkeindustrie, der Wasser- und Umweltüberwachung sowie in der klinischen Mikrobiologie und Bioprozesskontrolle. Übliche Medien sind Plate Count Agar (PCA) oder Tryptic Soy Agar (TSA); für Hefen und Schimmel Sabouraud-Dextrose-Agar. Alternative Methoden wie Membranfiltration oder Most-Probable-Number-Verfahren ergänzen die CFU-Zählung.