enzymatiskgravimetrisk

Enzymatisk gravimetrisk analys är en analytisk metod som kombinerar en enzymkatalyserad reaktion med gravimetrisk mätning för att kvantifiera ett ämne. Metoden bygger på att ett specifikt enzym omvandlar ett substrat till en produkt som bildar en fast, o löslig substans som kan filtreras, torkas och vägas. Den uppmätta massan används tillsammans med reaktionsstyrkan och stoikiometri för att bestämma koncentrationen av analyten.

Principen är att enzymatiska omvandlingar kan generera en eller flera fasta produkter under kontrollerade villkor. Efter reaktionen separeras den fasta fällningen från lösningen genom filtrering eller centrifugering, den tvättas noggrant för att avlägsna oönskade föroreningar, torkas och vägs med hög noggrannhet. Resultatet omvandlas sedan till koncentrationer via kända kalibreringsrelationer eller standardkurvor.

Användningsområden och tillämpningar är främst inom områden där enzymets specificitet kan utnyttjas för att öka selektiviteten i gravimetriska analyser. Exempel kan vara kvantifiering av specifika biomolekyler eller analyter där enzymatiska produkter bildar tydliga, vikbara fällningar. Metoden kan också användas för att undersöka enzymaktivitet genom att mäta mängden av den bildade fasta produkten.

Fördelar med enzymatisk gravimetrisk mätning inkluderar hög specificitet i avseende på enzym även vid komplexa matriser, samt robust gravimetrisk kvantifiering som inte kräver avancerad instrumentation. Begränsningar består i krav på stabila enzym och optimala reaktionsvillkor, fullständig fällning och noggrann kontroll av fuktpåverkan på massan, samt längre analytiska tider jämfört med vissa instrumentbaserade metoder.