GramFärbung

Die Gramfärbung ist eine differentialmikroskopische Färbemethode in der Bakteriologie, mit der sich Gram-positive von Gram-negativen Bakterien anhand der Eigenschaften ihrer Zellwand unterscheiden lassen. Sie wurde 1884 von Hans Christian Gram entwickelt und ist bis heute eine grundlegende, schnelle Erstdiagnostik in der klinischen Mikrobiologie.

Das zugrunde liegende Prinzip beruht auf der Zellwandstruktur der Bakterien. Beim Färbevorgang wird zunächst Kristallviolett als Primärfärbemittel angewendet, das in allen Zellen bindet. Danach erfolgt die Behandlung mit Jod als Fixativ (Mordant), wodurch ein stabiler Kristallviolett-Jod-Komplex entsteht. Bei der anschließenden Entfärbung mit Ethanol oder Acetone-Destillat wird die Zellwand von Gram-negativen Bakterien durchlässig, wodurch der Farbstoff ausströmt. Gram-positive Bakterien mit dickem Peptidoglykanlayer behalten den Farbstoff. Anschließend dient ein Gegenfärbemittel (z. B. Safranin) zur Ansicht als Kontrast; Gram-positive erscheinen violett, Gram-negative rosa bis rot.

Die Auswertung erfolgt mikroskopisch: Gram-positive Bakterien zeigen eine violette Verfärbung, Gram-negative eine rote/pinkanfarbene Verfärbung. Die Methode ist wichtig für die Orientierung in der Diagnostik und beeinflusst zeitnah Behandlungsentscheidungen. Sie hat jedoch Einschränkungen: Alter der Kultur, Uneinheitlichkeiten in der Probenvorbereitung, extrem dünne oder stark veränderte Zellwände können zu Gram-Variabilität führen. Einige Bakterien (z. B. Mykobakterien, Mykoplasmen) erscheinen nicht zuverlässig Gram-positiv oder -negativ. In solchen Fällen kommen zusätzliche Stainingsmethoden zum Einsatz.