termolyysillä

Termolyysillä tarkoittaa solujen, kudosten tai molekyyliryhmien lämpötilan aiheuttamaa hajoamista, jonka seurauksena solunsisäiset aineet vapautuvat. Termi juontuu sanoista termo- (lämpö) ja -lyysi (lisa), sekä nousee -llä -instrumentaaliksi viittaamaan keinoon. Käytännön yhteydessä termolyysillä viittaa yleensä lämpötilan kautta tapahtuvaan lyysiin ilman voimakasta mekaanista tai kemiallista käsittelyä.

Periaate on, että lämpö denatuuraa proteiineja ja destabiloi lipidikerroksia solukalvosta, mikä lisää läpäisevyyttä ja johtaa lopulta solun rikkoutumiseen. Vaikutus riippuu sekä lämpötilasta että altistusajasta: korkeammilla lämpötiloilla ja pidemmillä jaksoilla voidaan saavuttaa laajaa fragmentoitumista ja vapauttaa suurempi määrä solunsisäisiä sisältöjä, kun taas lievemmät ehdot voivat vapauttaa valikoidummin tiettyjä aineita.

Sovellukset vaihtelevat laboratorioista diagnostisiin näytevalmisteluihin. Termolyysillä käytetään nopeaan solujen ja kudosten lyysiin DNA:n, RNA:n tai proteiinien vapauttamiseksi ennen jatkoanalyysejä kuten PCR, sekvensointi tai proteiiniassays. Se on hyödyllinen erityisesti tilanteissa, joissa nopeus ja yksinkertaisuus ovat tärkeässä roolissa, mutta se ei aina sovi everyanalyysiin, koska lämpö voi myös vahingoittaa herkkiä biomolekyylejä.

Rajoitukset ja huomioitavat seikat liittyvät biomolekyylien fragmentoitumiseen, entsymaattisen toiminnan inaktivointiin sekä siihen, että lämpötilan ja ajan kontrollointi on kriittistä. Termolyysillä kilpailee kemialliset ja mekaaniset lyysimenetelmät, jotka voivat paremmin säilyttää analysoitavia yhdisteitä.

Lisäksi: termolyysillä esiintyy monissa protokollissa nimitykset kuten kuumapurkistus tai kuumenuslyysi, ja sen käytäntöjä kehitetään erilaisten näytteiden ja analyysien mukaan.