spektralfotometre

Spektralfotometer er et optisk instrument som måler, hvor meget lys en prøve absorberer ved forskellige bølgelængder. Instrumentet sammenligner lysintensiteten, der passerer gennem prøven, med lysintensiteten uden prøven og præsenterer resultater som absorbanse (A) eller transmissionsgrad (T) som funktion af bølgelængde.

Et spektralfotometer består typisk af en lyskilde, en monokromator, en prøveholder og en detektor. I enkelt-beam-systemer passerer lyset gennem prøven og videre til detektoren; i dobbelt-beam-system deles lyset i to baner, så en bruges som reference. Dette øger målestabilitet og reducerer baggrundsforstyrrelser.

Måleprincip og data: Absorbans A er log10(I0/I), hvor I0 er lysstyrken uden prøve og I er gennem prøven. Transmissionsgrad er I/I0. Ved Beer-Lambert-loven kan A = ε·l·c bruges til at bestemme koncentration, hvor ε er molar absorptivitet og l er cuvette-længde.

Typiske typer og anvendelser: UV-Vis-spektrofotometre måler ofte i området cirka 190–1100 nm. De findes som benchtop-, portable og integrerede systemer. Anvendelser ses i kemisk og biokemisk analyse, miljøovervågning, kvalitetskontrol, farmaceutisk industri, farvebestemmelse og enzymatiske målinger.

Stræbglys, baseline-drift, temperatur og forurening af cuvetter kan påvirke resultaterne. Korrekt kalibrering, rene cuvetter og korrekt cuvette-længde (typisk 1 cm) er vigtige. Målingerne bør understøttes af passende standarder og kontroller.