PCRbaserade

PCRbaserade metoder avser tekniker som bygger på polymeraskedjereaktion (PCR) för att amplifiera och analysera specifika DNA- eller RNA-sekvenser. Begreppet används ofta i sammanhang där PCR är central för diagnostik, forskning, rättsmedicin eller miljöövervakning.

Principen innebär cykliska temperaturväxlingar för att denaturera DNA, låta primers binda och låta en värmestabil polymeras syntetisera nya strängar. Varianter inkluderar kvantitativ PCR (qPCR) för mätning av nukleinsyra i realtid, omvänd transkriptas‑PCR (RT‑PCR) för RNA‑analys och digital PCR för mycket exakt kvantifiering.

PCRbaserade metoder kännetecknas av hög känslighet och specificitet, kort analysstid och flexibilitet vad gäller målsekvenser. De används för påvisande av patogener (till exempel virus och bakterier), genotypning, detektion av genetiska mutationer, miljömonitorering och identifikation vid brottsutredningar.

Begränsningar inkluderar risken för kontaminering och falsk positivt svar, primerdesignens betydelse för specificitet, påverkan av hämmare i provmaterial samt krav på kvalitetskontroller och standardisering. Tolkning av resultat kräver ofta kompletterande information om provets ursprung och laboratoriemetodik.

Utvecklingen av PCRbaserade tekniker fortsätter med fokus på snabbhet, automatisering och ökad robusthet, samt integration i point‑of‑care‑system för användning utanför traditionella laboratorier.