käänteistranskriptaation

Käänteistranskriptaatio on biokemiallinen prosessi, jossa RNA-molekyylistä kopioidaan DNA-sekvenssi. Tämä on käänteinen prosessi tavanomaiselle transkriptaatiolle, jossa DNA:sta kopioidaan RNA:ta. Käänteistranskriptaatiota suorittava entsyymi tunnetaan nimellä käänteistranskriptaasi. Tämä entsyymi on keskeinen retroviruksilla, kuten ihmisen immuunikatovirus (HIV), jotka käyttävät käänteistranskriptaatiota lisääntymissykliinsä.

Retroviruksen genomi on RNA-pohjainen. Kun virus infektoi isäntäsolun, se vapauttaa RNA-genominsa ja käänteistranskriptaasientsyyminsä solulimaan. Käänteistranskriptaasi käyttää virus-RNA:ta mallina ja syntetisoi siitä komplementaarisen DNA (cDNA) -juosteen. Tästä cDNA-juosteesta muodostuu kaksoisjuosteinen DNA. Tämä virus-DNA integroituu sitten isäntäsolun genomiin, missä sitä kutsutaan provirukseksi. Provirus voi pysyä inaktiivisena tai se voi aktivoitua ja transkriptoitua takaisin virus-RNA:ksi, mikä johtaa uusien viruspartikkelien muodostumiseen ja vapautumiseen.

Käänteistranskriptaatiolla on myös merkittävä rooli geeniteknologiassa ja molekyylibiologiassa. Sitä käytetään yleisesti cDNA-kirjastojen luomiseen, joissa tutkijat voivat kopioida ja analysoida aktiivisesti ilmentyviä geenejä. Lisäksi käänteistranskriptaatiota hyödynnetään PCR-tekniikassa (polymeraasiketjureaktio) nimeltään käänteistranskriptio-PCR (RT-PCR), jolla voidaan kvantifioida RNA-molekyylien määrä soluissa tai kudoksissa.