entsyymiimmunomääritykset

Entsyymi-immunomääritykset, lyhennettynä EIA tai ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), ovat biokemiallisia testejä, joita käytetään tunnistamaan ja kvantifioimaan tiettyjä aineita näytteessä, kuten proteiineja, peptidejä ja vasta-aineita. Nämä menetelmät perustuvat entsyymin ja vasta-aineen tai antigeenin spesifiseen sitoutumiseen.

Perusperiaatteena on, että testattava aine, eli antigeeni tai vasta-aine, sitoutuu kiinteään faasiin, kuten mikrolisälevyyn. Tämän jälkeen lisätään entsyymikonjugoitu vasta-aine, joka tunnistaa ja sitoutuu ensin kiinnittyneeseen aineeseen. Lopuksi lisätään substraatti, joka reagoi entsyymin kanssa tuottaen havaittavan signaalin, yleensä värimuutoksen. Signaalin voimakkuus on suoraan verrannollinen tutkittavan aineen pitoisuuteen näytteessä.

ELISA-menetelmiä on useita erilaisia, kuten suora, epäsuora, kilpaileva ja sandwich-ELISA, joista jokainen soveltuu hieman erilaisiin sovelluksiin riippuen siitä, tunnistetaanko antigeenia vai vasta-ainetta ja millainen herkkyys ja spesifisyys vaaditaan.

EIA-tekniikoita käytetään laajasti lääketieteellisessä diagnostiikassa esimerkiksi infektiosairauksien, hormonien ja syövän markkerien tunnistamisessa. Niitä hyödynnetään myös elintarviketeollisuudessa allergeenien tai epäpuhtauksien analysoinnissa sekä tutkimuslaboratorioissa erilaisten biologisten molekyylien pitoisuuksien määrittämiseen. Menetelmien etuja ovat korkea herkkyys, spesifisyys ja mahdollisuus käsitellä suuria näytemääriä.