ELISAmenetelmissä

ELISAmenetelmä, lyhenne sanoista enzyme-linked immunosorbent assay, on yleisesti käytetty immunologinen testi, joka havaitsee ja kvantifioi tiettyjä aineita, kuten proteiineja, peptidejä ja vasta-aineita, näytteistä. Se perustuu antigeenien ja vasta-aineiden spesifiseen sitoutumiseen. Menetelmä hyödyntää entsyymejä, jotka liitetään vasta-aineisiin. Kun entsyymi on sitoutunut kohdemolekyyliin, lisätään substraatti, joka muuttuu värilliseksi tai fluoresoivaksi entsyymin vaikutuksesta. Värin tai fluoresenssin voimakkuus on suoraan verrannollinen kohdemolekyylin määrään näytteessä, mikä mahdollistaa sen kvantifioinnin.

ELISA-testeissä on useita eri muunnelmia, kuten suora, epäsuora, kilpaileva ja sandwich ELISA, joista jokainen sopii hieman erilaisiin sovelluksiin. Suorassa ELISAssa antigeeni sitoutuu suoraan levyyn ja siihen liitetty entsyymi-konjugoitu vasta-aine havaitsee sen. Epäsuorassa ELISAssa ensin antigeeni sitoutuu levyyn, sitten siihen sitoutuu ensivasta-aine, johon puolestaan liittyy entsyymi-konjugoitu toisvasta-aine. Kilpailevassa ELISAssa kilpaillaan tutkittavan aineen ja siihen merkityn standardin kesken sitoutumisesta vasta-aineeseen. Sandwich ELISA hyödyntää kahta eri vasta-ainetta, jotka sitoutuvat eri kohtiin kohdemolekyyliä. ELISA-testejä käytetään laajasti lääketieteellisessä diagnostiikassa, elintarviketurvallisuudessa, biotekniikassa ja tutkimuksessa.