kjedevekstpolymerisering

Kjedevekstpolymerase (kjedevekstpolymerase, DNA-polymerase) er et enzym som katalyserer syntesen av DNA ved å legge til deoksyribonukleotider til 3'-endene av en eksisterende DNA-primer, i retningen fra 5' mot 3'. Polymerasen bruker en mal (templert DNA) og en primer for å starte syntesen, og krever vanligvis et metallion-ko-faktor (som Mg2+) og en buffer med riktig pH og ionestyrke. I tillegg oppviser noen polymeraser en 3'-5' exonukleaseaktivitet som gir proofreading og høyere presisjon, mens andre mangler dette og gir lavere feilrate.

I prokaryoter og eukaryoter finnes flere familie- og spesialiserte polymeraser. Historiske eksempler inkluderer familie A-polymeraser som Taq-polymerase (fra Thermus aquaticus) og Pfu-polymerase; familie B-polymeraser som Pfu og andre med høy fidelity; og eukaryotiske replikasjonspolymeraser Pol alpha, delta og epsilon, samt mitokondriell Pol gamma. I tillegg finnes translesjons-syntesepolymeraser i eukaryoter som Pol eta, iota, kappa og zeta som kan bypass DNA-skader.

DNA-polymeraser er sentrale i molekylærbiologi og diagnostikk, og brukes i polymerasekjedereaksjon (PCR) for å amplifisere DNA, i DNA-sekvensering, kloning, rekombinant uttrykk og studier av DNA-reparasjon. Valg av polymerase avhenger av behov for hastighet, temperaturmotstand og nøyaktighet.

Se også: DNA-polymerase, PCR, Sanger-sekvensering.