cryoelektronmikroskopi
Cryoelektronmikroskopija (cryo-EM) je tehnika u strukturnoj biologiji koja omogućuje određivanje molekularnih struktura biomolekula pri bliskim atomskim rezolucijama bez potrebe za kristalizacijom. Uz pomoć transmisijskog elektronskog mikroskopa, uzorak se priprema u vodnoj otopini i zamrzava brzim hlađenjem u vitreous ice, čime se očuvavaju prirodne konformacije i interakcije. Zračenju se izlaže malim dozama kako bi se smanjilo oštećenje, a slike se bilježe pomoću direktnih elektronskih detektora pri različitim projekcijama.
Najčešći pristup je single-particle analysis (SPA), kojim se 3D struktura složenih molekula rekonstruira iz velikog broja
Tipični tok uključuje pripremu uzorka i vitrifikaciju na mrežicama, zatim snimanje uzoraka na TEM-u pri niskim
Prednosti cryo-EM uključuju neovisnost o kristalizaciji, sposobnost rada s heterogenim i dinamičkim kompleksom te visoke rezolucije
Značajna dostignuća cryo-EM uključuju razradu struktura ribosoma, virusnih čestica i membranskih proteina, doprinoseći razumijevanju bioloških mehanizama